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国家食药监总局公开征求《辣椒制品中苏丹红Ⅰ的快速检测胶体金免疫层析法 (征求意见稿)》食品快速检测方法意见

2018年06月11日

近期,按照《中华人民共和国食品安全法》有关规定,为规范食品快速检测方法使用,食品药品监管总局组织制定了《辣椒制品中苏丹红Ⅰ的快速检测 胶体金免疫层析法(征求意见稿)》食品快速检测方法,已向社会公开征求意见。

1 范围

本方法规定了辣椒制品中苏丹红I的胶体金免疫层析快速检测方法。

本方法适用辣椒酱、辣椒油、辣椒粉中苏丹红I的快速测定。

2 原理

本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的苏丹红I与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗体和检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化,通过检测线与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中苏丹红I进行定性判定。

3 试剂和材料

除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的二级水。

3.1 试剂

3.1.1 乙腈。

3.1.2 无水硫酸镁。

3.1.3 正己烷。

3.1.4 二氯甲烷。

3.1.5 氢氧化钠。

3.1.6 氢氧化钠溶液(2mol/L):称取氢氧化钠(3.1.5)8g,用水溶解并稀释至100mL。

3.1.7 无水乙醇。

3.1.8 复溶液:将无水乙醇(3.1.7)与水按照体积比25:75混匀。

3.2 参考物质

苏丹红I参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1,纯度≥95%。

表1 苏丹红I参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量

中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子量
苏丹红I Sudan I 842-07-9 C16H12N2O 248.28

注:或等同可溯源物质。

3.3 标准溶液的配制

3.3.1 苏丹红I标准储备液(1mg/mL):精密称取苏丹红I参考物质(3.2)适量,置于10mL容量瓶中,加入适量乙腈(3.1.1)超声溶解后,用乙腈稀释至刻度,摇匀,制成浓度为1mg/mL的苏丹红Ⅰ标准储备液。-20 ℃避光保存,有效期6个月。

3.3.2 苏丹红I标准中间液(1μg/mL):精密量取苏丹红I标准储备液(1mg/mL)(3.3.1)100μL,置于100mL容量瓶中,用乙腈(3.1.1)稀释至刻度,摇匀,制成浓度为1μg/mL的苏丹红I标准中间液。

3.4 材料

3.4.1 固相萃取柱:CNW Poly-sery MIP-SDR固相萃取柱(200mg/3mL),或相当者。

3.4.2 苏丹红I胶体金免疫层析试剂盒,适用基质为辣椒酱、辣椒油、辣椒粉。

3.4.2.1 金标微孔。

3.4.2.2 试纸条或检测卡。

4 仪器和设备

4.1 移液器:200μL、1mL和5mL。

4.2 涡旋混合器。

4.3 离心机:转速≥4000r/min。

4.4 电子天平:感量为0.01g。

4.5 氮吹仪。

4.6 水浴锅。

4.7 环境条件:温度15℃~35℃,湿度≤80%。

5 分析步骤

5.1 试样制备

取适量样品,液体样品或半固体样品充分混匀,固体样品充分粉碎混匀。

5.2 试样的提取

5.2.1 辣椒酱

称取辣椒酱2g(精确至0.01g)于15mL离心管中,加入0.5g无水硫酸镁(3.1.2)和5mL正己烷(3.1.3)提取液,涡旋振荡1min后,4000r/min离心5min。将上清液全部加入到固相萃取柱(3.4.1)中,流出液弃去。再加入6mL正己烷淋洗固相萃取柱,流出液弃去。用2mL二氯甲烷(3.1.4)洗脱固相萃取柱,收集洗脱液吹干。精密加入400μL复溶液(3.1.8),涡旋混合1min,作为待测液,立即测定。

5.2.2 辣椒油

称取辣椒油5g(精确至0.01g)于15mL离心管中,加入8mL正己烷(3.1.3)进行提取,涡旋振荡1min后,将上清液全部加入到固相萃取柱中,流出液弃去。再加入6mL正己烷淋洗固相萃取柱,流出液弃去。用2mL二氯甲烷(3.1.4)洗脱固相萃取柱,收集洗脱液吹干。精密加入400μL复溶液(3.1.8),涡旋混合1min,作为待测液,立即测定。

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